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试题详情及答案解析
(2014•浙江模拟)某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示,最好应选用下列哪种质粒作为载体( )
A.B.C.D.
答案:D
试题分析:分析题图:目的基因左侧有限制酶NheⅠ和AluⅠ的识别序列,右侧有限制酶NheⅠ和SmaⅠ的识别序列,若仅用限制酶NheⅠ,能获取目的基因,但可能会导致自身环化或于运载体反向连接;若选用限制酶NheⅠ和AluⅠ,可能获取的是不含目的基因的DNA片段;因此最后选用限制酶NheⅠ和SmaⅠ来切割.
解:A、目的基因只有一侧含有限制酶NheⅠ的识别序列,用此酶不能获取目的基因,A错误;
B、目的基因两侧含有限制酶AluⅠ的识别序列,但只用此酶切割可能会导致目的基因和质粒反向连接或自身环化,B错误;
C、目的基因两侧含有限制酶NheⅠ和AluⅠ的识别序列,但用这两种酶切割可能会获得不含目的基因的片段,C错误;
D、目的基因两侧含有限制酶NheⅠ和SmaⅠ的识别序列,用这两种酶切割会获取目的基因,而且能防止目的基因和质粒的自身环化和反向连接,D正确.
故选:D.
点评:本题结合图解,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、使用工具及操作步骤,能分析目的基因两侧限制酶的分布情况,并能据此选出最合适的运载体,属于考纲理解层次的考查.