- 试题详情及答案解析
- （10分）多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入番茄细胞中，得到转基因番茄，具体操作流程如图。据图回答下列问题：
（1）若已获取PG的mRNA，可通过 获取PG基因。
（2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有 的培养基进行筛选。
（3）将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株，需要用 技术；其中，愈伤组织经____ 形成完整植株。
（4）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，通过观察细胞是否发生__ 现象来鉴别细胞壁是否再生。- 答案：（10分，每空2分）（1）逆转录法 （2）卡那霉素 （3）植物组织培养 再分化（或细胞增殖与分化） （4）质壁分离
- 试题分析：（1）已获取PG的mRNA，可通过逆转录法，即以此mRNA为模板，经逆转录酶催化，在体外逆转录合成DNA。
（2）从图中可知PG基因反向链接到质粒的四环素抗性基因中，则四环素抗性基因被破坏，而质粒上还含有卡那霉素抗性基因，故含目的基因的农杆菌感染番茄细胞后将会使受体细胞获得抗卡那霉素的能力，所以可用含卡那霉素的培养基进行筛选。
（3）因需将转入反向链接PG基因的番茄细胞培养成完整的植株，应利用植物细胞的全能性进行植物组织培养；其过程是植物细胞经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。
（4）有细胞壁的植物细胞在质量分数为25%的蔗糖溶液中会发生质壁分离现象，可以用来鉴别细胞壁是否再生。
考点：本题考查基因工程的原理及技术、植物的组织培养，意在考查学生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。