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试题详情及答案解析
(16分)草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,最终导致植物死亡。但是,它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前,已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。
取6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,但是是否成功还未知。图1为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图2为含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。据图回答下列问题:

(1)若A-C浇清水,D-F浇的水中含有草甘膦,上述植物中,肯定能健康成长的是________。
(2)若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲,在大肠杆菌培养基中还必须加入____________。
(3)一个完整的基因表达载体除了具备复制原点、启动子和终止子外,还应包括______和________。
(4)若需利用酶切法获得目的基因,最应选择的限制酶是________和________。
(5)通常用____________法将EPSPS基因导入植物体内。假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F仍没有表现出抗性,分析可能的原因____________。
答案:(1)ABCE     (2)草甘膦  (3)标记基因 目的基因  (4) MspⅠ      SmaⅠ
(5)农杆菌转化法  目的基因没有成功表达或表达的产物失活
试题分析:
(1)题干中植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过了转基因处理,是否成功还未知,所以A-C浇清水,都能健康成长。D-F浇的水中含有草甘膦,D肯定不能健康成长,E肯定能健康成长,F未知。因此肯定能健康成长的是ABCE。
(2)要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株,则必须要用含草甘膦的选择培养基培养大肠杆菌。
(3)一个完整的基因表达载体由复制原点、启动子、终止子、标记基因 、目的基因组成。
(4)对照图1和2所示,酶BamHⅠ、MboⅠ能破坏EPSPS基因,不能使用,应用MspⅠ与SmaⅠ同时进行酶切。
(5)将EPSPS基因导入植物体内通常用农杆菌转化法。如果EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但目的基因没有成功表达或表达的产物失活,植物F仍没有表现出抗性。
考点:本题考查基因工程的知识。意在考查能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论的能力。