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试题详情及答案解析
菊天牛是菊花的主要害虫之一。科研人员将抗虫基凶转入菊花,培育出抗虫菊花。下图是获得转基因菊花的技术流程。请据图回答:

(注:卡那霉素抗性基因(KanR为标记基因,菊花叶片对卡那霉素高度敏感)
(l)质粒是基因工程中最常用的载体,其化学本质是     ,此外还可用噬菌体、动植物病毒作用为载体。
(2)下图限制酶M和N切割产生的黏性末端是     ,连接它们所需要的基本工具是     

(3)为了促进土壤农杆菌吸收重组质粒,可用     处理;使其处于感受态。
(4)将愈伤组织转移到添加一定浓度植物激素、营养物质以及     的固体培养基中,在适宜条件下进行培养,筛选转基因菊花。
(5)用PCR方法检测转基因菊花是否含有目的基因时,需根据抗虫基因(目的基因)两端的部分碱基序列设计特异引物,若其中一种引物共用了31个,则目的基因最多扩增了     次。
(6)将转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料以适当比例混合后饲喂菊天牛2龄幼虫,实验结果如下表所示。

请据表回答(   )
①对照组应饲喂等量的     
②据表分析,     差异显著,说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。
答案:(1)小型环状DNA
(2)GATC (CTAG)    DNA连接酶    (3)Ca2+(或“CaCl2")
(4)卡那霉素    (5)5
(6)①非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物   ②实验组与对照组死亡率
试题分析:(1)质粒为细菌细胞质的环状DNA。(2)据图分析, 限制酶M和N切割后产生的相同黏性末端是GATC。需要DNA连接酶连接。(3)可以用氯化钙溶液处理土壤农杆菌,使之处于溶液吸收周围DNA状态,即感受态。(4)标记基因对应性状用来筛选导入目的基因的受体细胞,故要将愈伤组织培养在含卡那霉素培养基,(5)每生成一条子链需要一个引物,引物一共用了31个,故共生成31条子链,加上原来的一条模板链,共有32条DNA链,有16个DNA,16=25,故目的基因最多扩增了5次。(6)实验目的是探究转基因植株的杀虫效果,故自变量为转基因植株,实验组喂转基因植株,对照组应饲喂等量的正常植株。因变量为害虫数量,即实验组和对照组死亡率。
考点:本题考查基因工程相关知识和实验设计,意在考查考生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系,形成知识的网络结构能力;能运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断或得出正确的结论能力;具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法能力。