8. 萌发的小麦种子中α-淀粉酶和β-淀粉酶的含量会显著增高。α-淀粉酶不耐酸、较耐热,在pH为3.6、0℃下可迅速失活,而β-淀粉酶耐酸、不耐热,在70℃条件下15 min后失活。根据它们的这种特性,可分别测定一种酶的催化效率。某实验小组进行了“提取小麦种子中α-淀粉酶并测定α-淀粉酶催化淀粉水解的最适温度”的相关实验。
实验材料:萌发3天的小麦种子(芽长约1 cm)。
主要试剂及仪器:5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸馏水、石英砂、恒温水浴锅等。
实验步骤:
步骤一:制备酶溶液。
步骤二:_________________________,取出后冷却。
步骤三:取6支干净的、体积相同并具刻度的试管依次编号,按下表要求加入试剂,再观察各试管内的颜色变化。(注:+表示溶液变蓝色,-表示溶液不变色)
试管编号
| 1
| 2
| 3
| 4
| 5
| 6
|
5%的可溶性淀粉溶液(mL)
| 8
| 8
| 8
| 8
| 8
| 8
|
恒温水浴5 min
| 0℃
| 20℃
| 40℃
| 60℃
| 80℃
| 100℃
|
加入处理后的酶液
| 1
| 1
| 1
| 1
| 1
| 1
|
恒温水浴5 min
| 0℃
| 20℃
| 40℃
| 60℃
| 80℃
| 100℃
|
溶液混合,振荡后恒温水浴5 min
| 0℃
| 20℃
| 40℃
| 60℃
| 80℃
| 100℃
|
加入碘液,振荡后观察颜色变化
| +++
| ++
| +
| -
| ++
| +++
|
请回答下列问题:
(1)选用萌发的小麦种子提取酶液的主要理由是
。
(2)步骤二的具体操作是
。
(3)加入碘液,振荡后观察颜色变化,发现试管4中碘液不变色,能否据此推断α-淀
粉酶的最适合温度一定是60℃?
。理由是
。
该实验中能否选用斐林试剂检测实验结果?
。理由是
。
(4)若要进一步研究小麦种子中β-淀粉酶的最适温度,则需获得β-淀粉酶保持活性而
α-淀粉酶失活的酶溶液。请简要写出制备该种酶溶液的方法
。
资料表明:小麦种子发芽时,胚产生的赤霉素能诱导淀粉酶的合成。其主要机理可能是
。