12. 图1表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：
1.用图1中的外源DNA（含有目的基因D）和图2中的质粒构建重组质粒需要使用限制酶和
。前者（酶）的专一性很强，其作用特点是
。
2.应该使用限制酶BamHⅠ同时处理质粒、外源DNA，而不选择其他3种，原因在于（ ）。（多选）
A.若使用SmaⅠ或者MspⅠ会破坏目的基因
B.若使用SmaⅠ切割质粒，能成功切开质粒得到粘性末端的可能很低
C.若使用MboⅠ切割质粒，质粒上会有2处被切开，会将质粒切成两段不利于筛选
D.使用限制酶BamHⅠ能保证目的基因和质粒获得相同的粘性末端，以便目的基因和运载体定向连接，不至于反向连接
E．使用BamHⅠ切割质粒，质粒上会有1处被切开，破坏抗生素A抗性基因，保留抗生素B抗性基因，以便于将来筛选含目的基因的受体细胞
F．只有使用BamHⅠ切割，才能保证质粒和目的基因上产生相同的粘性末端。
3.若图1中虚线方框内的碱基对被T－A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，产物中共有
种不同DNA片段。若同时用限制酶MspⅠ、MboⅠ切割图2中的质粒，则可得到
个DNA片段。
