- 试题详情及答案解析
- （15分）2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
（1）④过程应用的主要生物技术是 ；该技术的过程主要包括___________和__________两个阶段,利用的基本原理是_______________。
（2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于 工程技术范畴。
（3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入____________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的 （基因），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用位点，有利于___________。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是 。
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为
，则该酶识别的核苷酸序列是 。- 答案：（1）植物组织培养（1分）脱分化（1分）再分化（1分） 植物细胞的全能性（1分）
（2）蛋白质（2分）
（3）①启动子（1分） ②tms和tmr（2分） 目的基因（或外源DNA）准确插入（2分）
③在含卡那霉素的培养基能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长（2分）
（4）GACGTC（2分） - 试题分析：（1）④过程是由细胞培养成个体，应用的主要生物技术是植物组织培养。经过和脱分化和再分化两个过程。主要的原理是植物细胞的全能性。
（2）人工设计合成基因指导合成非天然蛋白质，属于蛋白质工程。
（3）①基因表达需要启动子和终止子结构，图中缺少启动子②图中有两个限制酶Ⅱ的切割位点，处理后切除了两个切点之间的片段，包括了tms和tmr，这两个基因控制细胞分裂素和生长素，促使细胞分裂和生长。还切除了一个限制酶Ⅰ的切点片段，只剩下一个限制酶Ⅰ的切点，有利于目的基因准确插入。
③由于用限制酶Ⅱ处理时，tet基因（四环素抗性基因）被破坏，而neo基因（卡那霉素和新霉素抗性基因）没有被破坏，所以在含卡那霉素的培养基能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长。
（4）根据切口判断该酶识别的核苷酸序列是GACGTC。
考点：本题考查基因工程，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题。