- 试题详情及答案解析
- 内蒙古白绒山羊的血管内皮生长因子基因（VEGF164），若在皮肤毛囊细胞中特异性表达，可促进毛囊发育和毛发生长，显著提高羊毛产量。科学家将该基因导入羊胎儿的成纤维细胞核，成功培育出转基因克隆山羊。技术流程如下图，其中EcoRⅠ、SalⅠ、SphⅠ为限制酶。
请据图回答。
⑴在构建基因表达载体的过程中，应采用______（填限制酶名称）对质粒和含绿色荧光基因的DNA片段进行酶切，再经相应处理形成重组质粒。其中绿色荧光基因的作用是______。
⑵要使VEGF164在皮肤毛囊中表达，须将它与羊绒蛋白基因的______等调控组件重组起来，构建基因表达载体。
⑶图中①将基因表达载体导入胎儿成纤维细胞核的方法是______。将导入成功的细胞核注入到去核的卵母细胞构成重组细胞，培养成早期胚胎，经图中②______技术可培育成转基因克隆山羊。- 答案：⑴SalⅠ、SphⅠ 作为标记基因，检测目的基因是否导入成纤维细胞（作为标记基因）
⑵启动子、终止子（启动子）
⑶显微注射法 胚胎移植 - 试题分析：⑴在构建基因表达载体的过程中，应采用SalⅠ、SphⅠ对质粒和含绿色荧光基因的DNA片段进行酶切，EcoRⅠ能破坏复制原点的，再经相应处理形成重组质粒。其中绿色荧光基因的作用是作为标记基因，检测目的基因是否导入成纤维细胞。
⑵要使VEGF164在皮肤毛囊中表达，须将它与羊绒蛋白基因的启动子、终止子等调控组件重组起来，构建基因表达载体。
⑶图中①将基因表达载体导入胎儿成纤维细胞核的方法是显微注射法。将导入成功的细胞核注入到去核的卵母细胞构成重组细胞，培养成早期胚胎，经图中②胚胎移植技术可培育成转基因克隆山羊。
考点：本题考查基因工程和胚胎工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。