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试题详情及答案解析
苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得,为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用,许多学者做了大量研究,实验过程及实验结果如下:

①取小鼠肝癌Hepal-6细胞。
②制成单细胞悬液,等量接种于多孔板,加入等量培养液,每组设5个平行孔。
③于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h。
④加入等量不同浓度的SW溶液,于37℃、5%CO2培养箱中培养。
⑤分别在24 h、48 h、72 h时吸取培养液,观察记录结果,得到不同浓度的SW对细胞存活率的影响曲线如图所示。
⑥将培养48 h的培养液离心,细胞染色,在荧光显微镜下观察拍照,记录正常细胞和凋亡细胞的数目,并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量状况,汇总统计结果如下表。
培养48h后细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达状况
SW(μg/ml)
癌细胞数目
凋亡细胞数目
Bax蛋白
Bcl-2蛋白
2
+
++++
++++
+
1
++
+++
+++
++
0.5
+++
++
++
+++
0
++++
+
+
++++
注:“+”的数量表示相对值的大小
回答下列问题:
(1)实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液,于37℃、5%CO2培养箱中培养的目的是                 。培养箱中要有适量的无菌空气,原因是              。肝癌细胞悬液中细胞有悬浮生长的特征,可能的原因是                         
(2)实验中利用多孔板培养时,每组设置5个平行孔同时进行培养,计数后统计平均值是为了                       
(3)分析图中曲线可知,SW对肝癌Hepal-6细胞的作用效果是:①                                  ;②                                                       
(4)表中结果说明SW可以诱发细胞          ,从而抑制肿瘤细胞生长,从分子水平上分析,SW可能是导致癌细胞内              的合成量增加。
答案
(1)细胞克隆(细胞分裂、细胞增殖)         细胞需进行有氧呼吸  癌细胞表面糖蛋白减少,细胞黏
着性小
(2)减小偶然性误差(并使实验结果更可信)
(3)①SW浓度越高,对细胞生长(存活)的
抑制作用越强    ②SW作用时间越长,对细胞生长(存活)的抑制作用越强
(4)凋亡             Bax蛋白
试题分析:(1)动物细胞培养,制成单个细胞,防止接触抑制,给予适宜的环境,目的是让细胞克隆增殖;培养箱中要有适量的无菌空气,是因为细胞的生长需要进行有氧呼吸;癌细胞的特点之一是蛋白减少,细胞黏着性降低。⑵计数时设置5个平行孔,目的是为了减少误差。⑶相同作用时间,不同SW浓度对小鼠肝癌Hepal-6细胞有抑制,且随着SW浓度增加,抑制作用增强;同一SW浓度,不同作用时间对对小鼠肝癌Hepal-6细胞有抑制,且随着SW作用时间增加,抑制作用增强.⑷分析曲线图可知:SW浓度越高,对细胞生长(存活)的抑制作用越强;SW作用时间越长,对细胞生长(存活)的抑制作用越强,诱发细胞凋亡;从分子水平上分析,可能是由于SW导致癌细胞内Bax蛋白的合成量增多。
考点:本题主要考查设计实验,意在考查考生具有对一些生物学问题进行初步探究的能力,包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究方法和分析表格、处理数据的能力。